Olink Target 48 Test Kit

Koarte ynstruksjes

Incubation

Tariede de Incubation mix yn in mikrocentrifuge buis neffens de tabel hjirûnder.

Incubation mix per ½ 96-well plaat (μL)

• Olink® 1-48 plex Incubation Solution 168
• Olink® Target 48 Frw-probes 21
• Olink® Target 48 Rev-probes 21
• Totaal 210

1. Vortex en spin del de Incubation mix. Oerstapje 23 μL fan 'e Incubation-mix nei elke put fan in nije 8-well strip.
2. Oermeitsje 3 μL fan Incubation mix nei elke put fan 'e earste 6 kolommen fan in 96-well plaat troch reverse pipetting en neam de plaat Incubation Plate.
3. Add 1 μL fan elke sample mei in multi-kanaal pipet oan 'e boaiem fan' e put, 1 μl Sample Kontrolearje nei de trije boppeste putten (giel), 1 μL Negative Control nei twa putten (read), en 1 μL Calibrators oan trije putten (grien), neffens de plaat yndieling.
4. Slút de plaat mei in adhesive plastykfilm, spin op 400 - 1000 xg, 1 min by keamertemperatuer. Incubate oernacht by +4 ° C.
5. Thaw de PEA-oplossing oernacht by +4 °C, en pleats de PEA Enhancer oernacht by keamertemperatuer.

Utwreiding

Bereid in útwreidingsmix neffens de tabel hjirûnder.

Extension mix per ½ 96-well plaat (μL)

• Wetter mei hege suverens (+4 °C) 4350
• Olink® 1-48 plex PEA Enhancer 580
• Olink® 1-48 plex PEA Solution 580
• Olink® 1-48 plex PEA Enzyme 58
• Totaal 5 568

1. Bring de ynkubaasjeplaat nei keamertemperatuer, spin by 400 - 1000 xg foar 1 min. Preheat de PCR-masine.
2. Vortex de Extension-mix en gie it yn in multykanaal pipetreservoir.
3. Begjin in timer foar 5 min en ferpleatse 96 μL fan Extension-mix nei de boppeste dielen fan 'e putmuorren fan' e Incubation Plate troch it brûken fan reverse pipetting.
4. Fersegelje de plaat mei in nije adhesive plestikfilm, brûk de MixMate® om de plaat te vortexjen by 2000 rpm foar 30 sekonden, soargje derfoar dat alle putten mingd binne en spin del.
5. Plak de ynkubaasjeplaat yn 'e thermyske fytser en begjin it PEA-programma. (50 °C 20 min, 95 °C 5 min (95 °C 30 sek, 54 °C 1 min, 60 °C 1 min) x 17, 10 °C hold)

Deteksje

1. Tariede en prime in Olink® 48.48 IFC foar Protein Expression. Ynjeksje koart ien floeistofspuit foar kontrôleline yn elke accumulator op 'e chip, ferwiderje de beskermjende film fan' e boaiem fan 'e IFC en primearje dan de IFC op' e Olink® Signature Q100 neffens de ynstruksjes op it ynstrumintskerm.
2. Thaw de Primer Plate, vortex en spin koart.
3. Tariede in Detection mix neffens de tabel hjirûnder.
   Deteksjemix per ½ plaat mei 96 putjes (μL)
   1. Olink® 1-48 plex Detection Solution 275.0
   2. Wetter mei hege suverens 116.0
   3. Olink® 1-48 plex Detection Enzyme 3.9
   4. Olink® 1-48 plex PCR Polymerase 1.5
   5. Totaal 396.4
4. Vortex de Detection-mix en spin koart en foegje 46 μL fan 'e miks ta oan elke put fan in 8-well strip.
5. Oermeitsje 7.2 μL fan 'e Detection Mix nei elke put fan kolom 1-6 yn in nije 96-well plaat troch reverse pipetting, en neam it Sampde Plaat.
6. Ferwiderje de ynkubaasjeplaat fan 'e thermyske cycler, draai de ynhâld del en ferpleatse 2.8 μL nei de Sample Plate, mei help fan foarút pipetting.
7. Slút de plaat mei in adhesive film, vortex en spin beide op 400 - 1000 xg, 1 min by keamertemperatuer.
8. Oerstapje 5 μL fan elke boarne fan kolom 1-6 fan 'e Primerplaat en 5 μL fan elke boarne fan kolom 1-6 fan' e Sample Plate yn 'e primed 48.48 IFC lofts en rjochts inlets, respektivelik. Brûk reverse pipetting en feroarje tips nei eltse primer of sample. Lit gjin ynlaten leech litte.
9. Fuortsmite bubbels en lade de IFC yn de Olink Signature Q100 en folgje de ynstruksjes op it ynstrumint skerm.
10. Run de IFC op 'e Olink Signature Q100.

www.olink.com
© 2023 Olink Proteomics AB. Olink-produkten en tsjinsten binne allinich foar ûndersyksgebrûk en net foar gebrûk yn diagnostyske prosedueres. Alle ynformaasje yn dit dokumint is ûnderwerp te feroarjen sûnder notice. Dit dokumint is net bedoeld om gjin garânsjes, foarstellingen en / of oanbefellings fan hokker soart oer te bringen, útsein as sokke garânsjes, foarstellingen en / of oanbefellings eksplisyt oanjûn binne. Olink nimt gjin oanspraaklikens oan dy't fuortkomme út 'e aksjes fan in potensjele lêzer basearre op dit dokumint. OLINK en it Olink-logotype binne hannelsmerken registrearre, of yn ôfwachting fan registraasje, troch Olink Proteomics AB. Alle hannelsmerken fan tredden binne it eigendom fan har respektive eigners. Olink-produkten en assaymetoaden wurde behannele troch ferskate oktroaien en patintapplikaasjes https://www.olink.com/patents/. Olink Proteomics, Dag Hammarskjölds väg 52B , SE-752 37 Uppsala, Sweden 1126, v1.3, 2023-01-18

Dokuminten / Resources

Olink Target 48 Test Kit [pdfYnstruksjes Target 48, Test Kit, Target 48 Test Kit

Referinsjes

• User Manual